1. 肠癌原代细胞作育

　　至少提前半小时使用稀释后的Matrigel基质胶预铺作育瓶/板，使用前吸弃基质胶，用稀释液润洗一遍。将疏散并计数后的细胞悬液参考说明书表1中细胞数目接种于作育瓶/板，补加完全作育基至所需体积，轻轻摇晃混匀，75%酒精外貌消毒后置作育箱，37 ℃ 、5 % CO₂作育；原代细胞首次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁)，第一次换液建议换半液。

　　2. 肠癌原代细胞传代

　　镜下视察细胞形成克隆，且汇合度85~95%时即可传代；作育箱中取出细胞，弃旧作育液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5min后拿出轻拍作育瓶/板侧面，显微镜下视察细胞消化情形；细胞消化至细胞变圆并最先脱落时用原代细胞终止作育基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm，3 min；弃上清，以1~5 mL条件作育基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于作育瓶/板，(差别规格作育瓶/板底面积、接种原代细胞数目、添加滋养细胞数目详见说明书)，补加作育基至所需体积，十字交织混匀，作育容器75%外貌消毒后置37 ℃ 、5 % CO₂作育箱作育。其他办法同上。